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Title: Caracterização genética do complexo Anopheles albitarsis (Diptera: Culicidae), utilizando genes mitocondriais e nuclear
Other Titles: Genetic characterization of the Anopheles albitarsis complex (Diptera: Culicidae), using mitochondrial and nuclear genes
Authors: Azevedo O, Wagner
metadata.dc.contributor.advisor: Rafael S, Míriam
metadata.dc.contributor.co-advisor: Batista S, Jacqueline
Keywords: Complexo Anopheles albitarsis
Plasmodium
Malária
Doenças negligenciadas
Issue Date: 30-Apr-2021
metadata.dc.publisher.program: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva - GCBEv
Abstract: Anopheles albitarsis is a species complex involved in the transmission of malaria in South America. This complex comprises five species formally named (Anopheles albitarsis s.s., Anopheles marajoara, Anopheles deaneorum, Anopheles janconnae, Anopheles oryzalimnetes) and four others have not yet been formally named (Anopheles albitarsis F, Anopheles albitarsis G, Anopheles albitarsis H and Anopheles albitarsis I). The objective was to characterize and complement the taxonomic status of the An. Albitarsis complex, through the mitochondrial genes COI (584 bp) and ND5 (387 bp), and the ribosomal DNA subunit 28 (603 bp) of specimens collected in areas of the Amazon, Midwest and Southeast Brazil. The K2P genetic distance method was implemented for the COI and ND5 genes. Of the 134 sequences generated for the COI gene, 28 haplotypes were identified, being 98 sequences of the ND5 gene, 21 haplotypes; of 84 sequences from the 28S region, 5 haplotypes. Comparative analysis (BLASTn) of the COI and ND5 haplotypes genes confirmed six spicies of the albitarsis complex (An. albitarsis s.s., An. marajoara, An. deaneorum, An. oryzalimnetes, An. albitarsis G and An. albitarsis H). However, like the ND5 gene, the 28S gene showed stop codon regions, and in the comparative analysis (BLASTn) all 28S haplotypes showed 57% Query cover with An. marajoara, An. albitarsis s.s. and An. oryzalimnetes still, 100% Query cover with An. albimanus, probably meaning a pseudogenic region inherited by An. albitarsis s.l. of the common ancestor between the two species. The genetic divergence between the groups identified ranged from 0.19 to 0.42 (COI) and from 0.034 to 0.67 (ND5). Two probable lineages were detected within An. marajoara and An. albitarsis G. The interspecific averages of the An. marajoara I, An. marajoara II, An. albitarsis GI and An. albitarsis G II new lineages were 2.6%, 2.7%, 3.1% and 3.2%, respectively. The NJ, MV and IB cladograms analysis revealed six monophyletic groups with support values from 66% to 100%. The lineages within An. marajoara and An. albitarsis G obtained support data that ranged from 66% (IB) to 100% (IB). Anopheles albitarsis s.s., which is a typical of cold regions, was captured in the State of Acre, Brazil, which has an equatorial climate. In this sense, it is necessary to capture a larger sample number of this mosquito, in the same locations used in the presente work, and in other adjacente locations, to accurately confirm its occurrence in the North of South America region. In addition, to make new captures of An. marajoara and An. albitarsis G, in the referred State of Amazonas, for the best investigation of the evolutionary lineages of both species, in the State. The results obtained from this work contributed to a better update and understanding of the distribution of species of the An. albitarsis complex.
metadata.dc.description.resumo: Anopheles albitarsis é um complexo de espécies envolvido na transmissão da malária, na América do Sul. Este complexo compreende cinco espécies formalmente nomeadas (Anopheles albitarsis s.s., Anopheles marajoara, Anopheles deaneorum, Anopheles janconnae, Anopheles oryzalimnetes) e outras quatro ainda não nomeadas formalmente (Anopheles albitarsis F, Anopheles albitarsis G, Anopheles albitarsis H e Anopheles albitarsis I). Objetivou-se caracterizar e complementar o status taxonômico do complexo An. albitarsis, por meio dos genes mitocondriais COI (584 pb) e ND5 (387 pb), e a subunidade do DNA ribossomal 28 (603 pb) de espécimes coletados em áreas da Amazônia, Centro-Oeste e Sudeste brasileiros. Foi implementado o método de distância genética K2P, para os genes COI e ND5. Das 134 sequências geradas para o gene COI, foram identificados 28 haplótipos; de 98 sequências do gene ND5, 21 haplótipos; de 84 sequências da região 28S, 5 haplótipos. A análise comparativa (BLASTn) dos haplótipos do gene COI e ND5 confirmaram seis espécies do complexo An. albitarsis (An. albitarsis s.s., An. marajoara, An. deaneorum, An. oryzalimnetes, An. albitarsis G e An. albitarsis H). No entanto, assim como o gene ND5, o gene 28S apresentou regiões de stop codons, e na análise comparativa (BLASTn) todos os haplótipos de 28S revelaram 57% de Query cover com An. marajoara, An. albitarsis s.s. e An. oryzalimnetes, porém, 100% de Query cover com An. albimanus, significando, provavelmente, uma região pseudogênica herdada por An. albitarsis s.l. do ancestral em comum entre as duas espécies. A divergência genética entre os grupos identificados variou de 0.19 a 0.42 (COI) e de 0.034 a 0.67 (ND5). Duas prováveis linhagens foram detectadas dentro An. marajoara e An. albitarsis G. As médias interespecíficas das linhagens An. marajoara I, An. marajoara II, An. albitarsis G I e An. albitarsis G II foram 2.6%, 2.7%, 3.1% e 3,2%, respectivamente. A análise dos cladogramas de NJ, MV e IB revelaram seis grupos monofiléticos com valores de suporte de 66% a 100%. As linhagens dentro de An. marajoara e An. albitarsis G obtiveram suporte que variou de 66% (IB) a 100% (IB). O An. albitarsis s.s., que é típico de regiões frias, foi capturado no Estado do Acre, que é de clima equatorial. Nesse sentido, faz-se necessária a captura de um número amostral maior desse mosquito, nas mesmas localidades utilizadas no presente trabalho, e em outras localidades adjacentes, para confirmar com precisão a sua ocorrência na região Norte da América do Sul. Além disso, realizar novas capturas de An. marajoara e An. albitarsis G, no referido Estado do Amazonas, para a melhor investigação das linhagens evolutivas de ambas as espécies, no Estado. Os resultados obtidos deste trabalho contribuíram para uma melhor atualização e compreensão da distribuição de espécies do complexo An. albitarsis.
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