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Título: Cultura de Tecidos Vegetais de Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae) e Isolamento do Trans-decosil-4-hidroxi-3-metoxicinamato
Autor: Morais, Fabianne Lopes
Orientador: Nenez, Cecilia Veronica
Palavras-chave: Olacaceae
fitoquímica
Data do documento: 23-Set-2021
Editor: Instituto Nacional Pesquisas da Amazônia - INPA
Programa: Botânica
Abstract: Minquartia guianensis (Olacaceae) is a plant species of high economic value in the Amazon region, is intensively exploited by the timber sector for several purposes due to the high durability of its wood. The species is also used for medicinal purposes by Indians and riverine populations, against intestinal infections, rheumatism, pains and skin irritations. Chemical studies report the presence of several substances with great biological potential. The present work aimed to obtain callus in vitro of M. guianensis in order to isolate the chemical substances from their extracts. For this, this work followed two fronts, being the first with the multiplication and phytochemical analysis of callus obtained from previous studies; and the second, following the steps of formation of new calluses from a new collection. The previously established callus in vitro were multiplied in MS culture medium (Murashige and Skoog) with growth regulators 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and kinetin (CIN). After drying and milling, the calluses were extracted with dichloromethane (DCM), Methanol (MeOH) and Water (H2O). The DCM extract provided the substance trans-docosyl-4-hydroxy3-methoxycinnamate (docosyl trans-ferulate). Regarding the formation of new callus, leaves and seeds of an adult specimen of M. guianensis were collected at INPA, which were submitted to disinfestation in fungicide + streptomycin, 70% ethanol, calcium hypochlorite and sodium hypochlorite, where it was possible To obtain an efficient disinfestation protocol for leaf explants. The seeds were inoculated in MS medium with addition of gibberellic acid (GA3) and after 120 days four seedlings were obtained. The leaves of the seedlings obtained from in vitro germination and the in vivo specimen were inoculated in 100% MS culture medium; MS 50% and WMP (Wood Medium Plant) added with the growth regulators 2,4-D and CIN, where callus formation was possible in all treatments, but there was oxidation and leaf tissue death in all treatments. This is the first report of tissue culture of the M. guianensis species and the isolation of the trans-docosyl-4-hydroxy-3-methoxycinnamate substance produced by calluses.
Resumo: Minquartia guianensis (Olacaceae) é uma espécie vegetal de elevado valor econômico na região Amazônica, é intensamente explorada pelo setor madeireiro para diversos fins devido à alta durabilidade de sua madeira. A espécie também é utilizada para fins medicinais por índios e populações ribeirinhas, contra infecções intestinais, reumatismo, dores e irritações cutâneas. Estudos químicos relatam a presença de diversas substâncias com grande potencial biológico. O presente trabalho visou obter calos in vitro de M. guianensis a fim de identificar e isolar as substâncias químicas de seus extratos. Para isto, este trabalho seguiu duas frentes, sendo a primeira com a multiplicação e análise fitoquímica dos calos obtidos de estudos prévios; e a segunda, seguindo as etapas de formação de novos calos a partir de uma nova coleta. Os calos previamente estabelecidos in vitro, foram multiplicados em meio de cultura MS (Murashige e Skoog) com reguladores de crescimento, ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e cinetina (CIN). Após secagem e moagem, os calos foram extraídos com diclorometano (DCM), metanol (MeOH) e água (H2O). O extrato DCM forneceu a substância trans-docosil-4-hidroxi-3- metoxicinamato (trans-ferulato de docosila). Quanto à formação de novos calos, foram coletadas folhas e sementes de um espécime adulto de M. guianensis no INPA, que foram submetidos a processos de desinfestação em fungicida + estreptomicina, etanol 70%, hipoclorito de cálcio e hipoclorito de sódio, onde foi possível obter um protocolo eficiente de desinfestação para os explantes foliares. As sementes foram inoculadas em meio de cultura MS com adição de ácido giberélico (GA3) e após 120 dias obtiveram-se quatro plântulas. As folhas das plântulas obtidas da germinação in vitro e do espécime in vivo, foram inoculados em meio de cultura MS 100%; MS 50% e WPM (Wood Plant Medium) adicionado com os reguladores de crescimento 2,4-D e CIN, onde foi possível a formação de calos em todos os tratamentos, porém houve oxidação e morte do tecido foliar em todos os tratamentos. Este é o primeiro relato de cultura de tecidos da espécie M. guianensis e do isolamento da substância trans-docosil-4-hidroxi-3-metoxicinamato produzida por calos.
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