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Título: Potencial biotecnológico de espécies dos gêneros streptomyces e bacillus isolados dos rios madeira e purus para aplicação agrícola
Autor: Silva, Ingride Jarline Santos
Orientador: Silva, Gilvan Ferreira
Coorientador: Procópio, Rudi Emerson de Lima
Palavras-chave: Atividade antimicrobiana, bioproduto, fitopatógeno.
Bacillus e Streptomyces
Data do documento: 23-Ago-2022
Editor: Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA
Programa: Agricultura no Trópico Úmido - ATU
Abstract: Microorganisms are known for their high capacity to produce bioactive compounds that have a wide range of applications. In addition to the natural products with biotechnological potential produced, many microorganisms have been used in the development of agricultural bio-inputs applied in disease control and plant growth promotion. In this context, the present work aimed to isolate, select and characterize Bacillus and Streptomyces species from sediments of the Madeira and Purus Rivers with potential for the control of phytopathogens. 145 isolates were screened for the formation of inhibition halos against phytopathogenic fungi: Colletotrichum siamense, Fusarium decemcellulare and Moniliophthora perniciosa. Based on the results of antibiosis, 38 isolates were selected for analysis of mycelial growth inhibition (PIC), which ranged from 0 to 90% for at least one of the three phytopathogens. Molecular identification based on the 16S region characterized the isolates with antifungal activity in two genera: Bacillus and Streptomyces. From each genus, three isolates were selected for morphological characterization and activity tests against other pathogens. From the genus Streptomyces, isolates APUR 32.5, MPUR 40.3, MPUR 46.7 were selected, whose multilocus phylogenetic analysis based on gyrB, trpB and 16S region genes indicated them as possible new species. The three Streptomyces isolates were tested against seven other different phytopathogens (Corynespora cassiicola, Colletotrichum guaranicola, Colletotrichum sp., Pseudocercospora fijiensis, Neopestalotiopsis formicarum, Pseudopestalotiopsis gilvanii and Rhizoctonia sp.) indicating that the best performance was against C. guaranicola, with PIC values ranging from 73 to 84%. The three selected Bacillus isolates (MPUR 33.1, MPUR 35.2 and MPUR 44.1), when tested against several phytopathogens, showed better activity against M. perniciosa, with values ranging from 80 to 88%. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of extracts from Streptomyces isolates showed 100% inhibition against M. perniciosa. The bactericidal action was demonstrated by the extract of the isolate MPUR 40.3 against B. cereus at a concentration of 50 ppm. In addition to their antimicrobial activity, Streptomyces isolates were also shown to produce amylase, cellulase, lipase or protease.
Resumo: Os microrganismos são conhecidos pela alta capacidade de produzir compostos bioativos que apresentam uma ampla gama de aplicações. Além dos produtos naturais com potencial biotecnológico produzidos, muitos microrganismos tem sido utilizados no desenvolvimento de bioinsumos agrícolas aplicados no controle de doenças e promoção de crescimento de plantas. Neste contexto, o presente trabalho teve como objetivo isolar, selecionar e caracterizar espécies de Bacillus e Streptomyces de sedimentos dos Rios Madeira e Purus com potencial para o controle de fitopatógenos. Foram triados 145 isolados quanto a formação de halos de inibição contra os fungos fitopatogênicos: Colletotrichum siamense, Fusarium decemcellulare e Moniliophthora perniciosa. Com base nos resultados da antibiose, foram selecionados 38 isolados para análise da inibição do crescimento micelial (PIC) que variou de 0 a 90% para pelo menos um dos três fitopatógenos. A identificação molecular com base na região 16S, caracterizou os isolados com atividade antifúngica em dois gêneros: Bacillus e Streptomyces. De cada gênero, foram selecionados três isolados para caracterização morfológica e testes de atividade contra outros patógenos. Do gênero Streptomyces foram selecionados os isolados APUR 32.5, MPUR 40.3, MPUR 46.7, cuja análise filogenética multilocus baseada nos genes gyrB, trpB e região 16S indicou-os como possíveis novas espécies. Os três isolados de Streptomyces foram testados contra outros sete diferentes fitopatógenos (Corynespora cassiicola, Colletotrichum guaranicola, Colletotrichum sp., Pseudocercospora fijiensis, Neopestalotiopsis formicarum, Pseudopestalotiopsis gilvanii e Rhizoctonia sp.) indicando que o melhor desempenho foi contra C. guaranicola, com valores de PIC variando de 73 a 84%. Já os três isolados de Bacillus selecionados (MPUR 33.1, MPUR 35.2 e MPUR 44.1), quando testados contra vários fitopatógenos, apresentaram melhor atividade contra M. perniciosa com valores variando de 80 a 88%. A Concentração Mínima Inibitória (MIC) de extratos dos isolados de Streptomyces demonstrou inibição de 100% contra M. perniciosa. A ação bactericida foi demostrada pelo extrato do isolado MPUR 40.3 contra B. cereus na concentração de 50 ppm. Além da atividade antimicrobiana, os isolados de Streptomyces também se mostraram produtores de amilase, celulase, lipase ou protease.
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