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Título: variabilidade genética em populações naturais de Anopheles (Nyssorhynchus) Darlingi Root, 1926 (Diptera: Culicidae)
Autor: Santos, Joselita Maria Mendes dos
Orientador: Contel, Eucléia Primo B.
Palavras-chave: Genética de populações
Isoenzima
Anopheles
Malária
Data do documento: 1992
Editor: Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA
Programa: Entomologia
Abstract: Para o estudo da diferenciação geográfica de populações naturais de Anopheles darlingi da Amazônia, foram analisadas amostras procedentes de Ariquemes, Porto Velho/Samuel, Manaus e Cachoeira Porteira. Foram estudados onze sistemas protéicos em eletroforese de gel de amido, amido-agarose e poliacrilamida. De todos os sistemas analisados, as esterases foram as mais polimórficas, com cinco regiões de atividade, variação em três delas; e modificações na expressão gênica durante o desenvolvimento. As esterases 1 e 2 mostraram maior intensidade. de coloração nos' estádios larvais,.,sendo que esta é reduzida em pupas e adultos; as esterases 3 e 4 são reveladas com mais intensidade nestes dois Últimos estágios e a esterase 5 presente durante todo o desenvolvimento. A leucina aminopeptidase revelou seis zonas de atividade durante a ontogenia, sendo a aLAP1 e LAPS características de larvas. A LAP3 foi específica de pupas e adultos e a LAP4 detectada somente em pupas. LAP2 e LAP6 foram reveladas em todos os estágios dodesenvolvimento. A a-glicerofosfato desidrogenase apresentou uma única região de atividade em gel de amido, sendo revelada em larvas de 4" estádio velhas (pigmentadas) e a atividade é intensificada a partir do estágio de pupa. Em gel de poliacrilamida, foram detectadas duas regiões de atividade (a-GPDB1 e a-GPDH2). Estas regiões foram reveladas também em larvas de 4" estádio velhas (pigmentadas) e esta atividade aumenta à medida que atinge o estágio adulto. Na análise populacional foram estudados 19 locos de 11 sistemas proteicos, dos quais 12 mostraram variação, com uma proporção de locos polimórfícos de 68,40%. Os fenótipos detectados nestas proteínas polimódicas sugerem que 70% possam ser monornéricas (ESTl , BT2, ESTS, LAPS, LAP6, PGM e ODH2) e 30% dimléricas (IDH1, ODH1 e A01). O número de alelos detectados nos diferentes locos variou de 2 a 5, todos eles de ação codominante. Os dados de freqüências alélicas mostraram diferenças significativas entre os locos analisados, sendo EST2 e IDH1 os que apresentaram valores de qui-quadrado significativos na maioria das populações. Para o primeiro, apenas na população de Porto VelholSamuel, mostrou suas freqüências genotípicas em equilíbrio de Hardy-Weinberg (X = O,%; P > 0,05) e o segundo, somente na população de Manaus, sem considerar os alelos agrupados (X2 = 5,72; P > 0,05). Considerando-sé todos os locos, constata-se que, na maioria dos casos, os valores observados das classes homozigotas foram maiores que os esperados. A população de Ariquemes mostrou maior variabilidade, com maior número de alelos por loco (2,26 & 0,27) e maior polimorfismo (P = 63,15). A menor variabilidade foi verificada nas populações de Cachoeira Porteira e Manaus, com a mesma proporção de l ~polism6rf icos (P = 52,63). L Levando-se em conta os níveis de heterozigosidade intraloco observada e esperada, os maiores valores foram observados na população de Manaus @o = 0,432 f O, 11; Ke = 0,375 f 0,08), e os menores na população de Cachoeira Porteira (fio = 0.,236 f 0,09; He =',290 f 0,ll). Para as estatísticas F de Wright, os resultados mostraram desequilíbrio decorrente de excesso de homozigotos, conforme mostram os valores de F, > F,, (0,083 > 0,026), denotando uma certa diferenciação intra- populacional. As quatro populações estudadas foram muito semelhantes geneticamente, conforme indicam os valores de distância e similaridade (D = 0,10 - 0,024; I = 0,976 - 0,990). Embora as populações sejam muito próximas, o dendograrna resultante da matriz de distância e similaridade, agrupa as populações de Ariquemes, Cachoeira Porteira e Porto VelholSamuel num mesmo "cluster" , separando-as da população de Manaus. Comparando-se a variabilidade enzimática com os dados de variabilidade cromossômica, constata-se que há divergência quanto à estnitufa das populações. Enquanto que para a primeira predominam as classes dos homozigotos, para a variabilidade cromossÔmica há excesso de heterozigotos, inclusive com valores acima de 50%. Os dados deste trabalho mostraram que as populações apresentam os valores de F, > F,, caracterizando uma diferenciação inicial maior intra-populacional. O efeito de Wahlund foi proposto para explicar o excesso das classes homozigotas, para a maioria dos locos estudados.
Resumo: Para o estudo da diferenciação geográfica de populações naturais de Anopheles darlingi da Amazônia, foram analisadas amostras procedentes de Ariquemes, Porto Velho/Samuel, Manaus e Cachoeira Porteira. Foram estudados onze sistemas protéicos em eletroforese de gel de amido, amido-agarose e poliacrilamida. De todos os sistemas analisados, as esterases foram as mais polimórficas, com cinco regiões de atividade, variação em três delas; e modificações na expressão gênica durante o desenvolvimento. As esterases 1 e 2 mostraram maior intensidade. de coloração nos' estádios larvais,.,sendo que esta é reduzida em pupas e adultos; as esterases 3 e 4 são reveladas com mais intensidade nestes dois Últimos estágios e a esterase 5 presente durante todo o desenvolvimento. A leucina aminopeptidase revelou seis zonas de atividade durante a ontogenia, sendo a aLAP1 e LAPS características de larvas. A LAP3 foi específica de pupas e adultos e a LAP4 detectada somente em pupas. LAP2 e LAP6 foram reveladas em todos os estágios dodesenvolvimento. A a-glicerofosfato desidrogenase apresentou uma única região de atividade em gel de amido, sendo revelada em larvas de 4" estádio velhas (pigmentadas) e a atividade é intensificada a partir do estágio de pupa. Em gel de poliacrilamida, foram detectadas duas regiões de atividade (a-GPDB1 e a-GPDH2). Estas regiões foram reveladas também em larvas de 4" estádio velhas (pigmentadas) e esta atividade aumenta à medida que atinge o estágio adulto. Na análise populacional foram estudados 19 locos de 11 sistemas proteicos, dos quais 12 mostraram variação, com uma proporção de locos polimórfícos de 68,40%. Os fenótipos detectados nestas proteínas polimódicas sugerem que 70% possam ser monornéricas (ESTl , BT2, ESTS, LAPS, LAP6, PGM e ODH2) e 30% dimléricas (IDH1, ODH1 e A01). O número de alelos detectados nos diferentes locos variou de 2 a 5, todos eles de ação codominante. Os dados de freqüências alélicas mostraram diferenças significativas entre os locos analisados, sendo EST2 e IDH1 os que apresentaram valores de qui-quadrado significativos na maioria das populações. Para o primeiro, apenas na população de Porto VelholSamuel, mostrou suas freqüências genotípicas em equilíbrio de Hardy-Weinberg (X = O,%; P > 0,05) e o segundo, somente na população de Manaus, sem considerar os alelos agrupados (X2 = 5,72; P > 0,05). Considerando-sé todos os locos, constata-se que, na maioria dos casos, os valores observados das classes homozigotas foram maiores que os esperados. A população de Ariquemes mostrou maior variabilidade, com maior número de alelos por loco (2,26 & 0,27) e maior polimorfismo (P = 63,15). A menor variabilidade foi verificada nas populações de Cachoeira Porteira e Manaus, com a mesma proporção de l ~polism6rf icos (P = 52,63). L Levando-se em conta os níveis de heterozigosidade intraloco observada e esperada, os maiores valores foram observados na população de Manaus @o = 0,432 f O, 11; Ke = 0,375 f 0,08), e os menores na população de Cachoeira Porteira (fio = 0.,236 f 0,09; He =',290 f 0,ll). Para as estatísticas F de Wright, os resultados mostraram desequilíbrio decorrente de excesso de homozigotos, conforme mostram os valores de F, > F,, (0,083 > 0,026), denotando uma certa diferenciação intra- populacional. As quatro populações estudadas foram muito semelhantes geneticamente, conforme indicam os valores de distância e similaridade (D = 0,10 - 0,024; I = 0,976 - 0,990). Embora as populações sejam muito próximas, o dendograrna resultante da matriz de distância e similaridade, agrupa as populações de Ariquemes, Cachoeira Porteira e Porto VelholSamuel num mesmo "cluster" , separando-as da população de Manaus. Comparando-se a variabilidade enzimática com os dados de variabilidade cromossômica, constata-se que há divergência quanto à estnitufa das populações. Enquanto que para a primeira predominam as classes dos homozigotos, para a variabilidade cromossÔmica há excesso de heterozigotos, inclusive com valores acima de 50%. Os dados deste trabalho mostraram que as populações apresentam os valores de F, > F,, caracterizando uma diferenciação inicial maior intra-populacional. O efeito de Wahlund foi proposto para explicar o excesso das classes homozigotas, para a maioria dos locos estudados.
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