Dissertação
Mapeamento cromossômico de elementos retrotransponíveis rex1, rex3 e rex6 e detecção da heterocromatina em Tambaqui (Colossoma macropomum) expostos ao antiparasitário triclorfon
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Instituto Nacional de Pesquisa da Amazônia - INPA
Resumo
Os genomas dos organismos eucariotos são constituídos por uma grande fração de
DNA repetitivo abrangendo os elementos transponíveis (ETs). Os ETs consistem em
entidades estruturais e reguladoras que aliadas a alterações epigenéticas podem dirigir a
adaptação e evolução fornecendo fenótipos adaptativos, com capacidade de responder de
forma distinta de acordo com desafios específicos de estresse. Os retroelementos do tipo Rex
correspondem as classes de ETs mais conhecidas e com maior distribuição em peixes,
desempenhando um papel importante na dinâmica evolutiva desse grupo e amplamente
distribuídos no seu genoma. Com intuito de analisar os efeitos do antiparasitário Triclorfon na
mobilização de elementos retrotansponíveis do tipo Rex em cromossomos mitóticos de
tambaqui (Colossoma macropomum), realizou-se o mapeamento cromossômico de elementos
retrotransponíveis Rex1, Rex3, Rex6 e detecção da heterocromatina constitutiva. Os
exemplares de tambaqui foram aclimatados durante 40 dias, posteriormente a (CL50-96h= 0,870
mg/L) foi determinada.. Neste estudo os peixes foram distribuídos e foram estabelecidas duas
concentrações a serem utilizadas: C1-30% e C2-50% do valor da CL50-96h, foram utilizados
para esse experimento 9 tanques de polietileno com volume de água controlados de 60 litros
contendo 6 peixes em cada tanque. O tambaqui apresentou 2n= 54 cromossomos (26m +
28sm) e número fundamental (NF) 108, foi evidenciada a presença predominante de blocos
heterocromáticos nas porções centroméricas de todos os pares de cromossomos mitóticos do
grupo controle e presença de blocos heterocromáticos mais conspícuos com marcações
biteloméricas e marcações na região terminal na condição de maior concentração de
Triclorfon. A distribuição dos retroelementos Rex1, Rex3, Rex6 mostraram-se dispersa e
diferenciada, os sítios de Rex1 e Rex6 exibiram um perfil de distribuição mais disperso
enquanto o Rex3 apresentou aumento na intensidade de marcações e no padrão de
distribuição, além da associação com blocos heterocromáticos de forma proeminente em (C2-
72h), possivelmente mediadas por mecanismos epigenéticos adaptativos voltados a reprimir a
mobilização desses retroelementos induzidas pela exposição ao Triclorfon mais evidente nos
exemplares expostos à maior concentração e ao maior período de exposição, podendo refletir
na diversidade genética necessária para que essas espécies consigam se adaptar às mudanças
ambientais.
Abstract:
The genomes of eukaryotic organisms are constituted by a large fraction of repetitive
DNA covering the transposable elements (TEs). TEs consist of structural and regulatory
entities that, combined with epigenetic changes, can direct adaptation and evolution by
providing adaptive phenotypes with the capacity to respond differently to specific stress
challenges. The Rex-type retroelements correspond to the classes of TEs that are better
known and with greater distribution in fish, playing an important role in the evolutionary
dynamics of this group and widely distributed in their genome. In order to analyze the effects
of Triclorfon antiparasitic on the mobilization of retranslatable elements of the Rex type in
tambaqui mitotic chromosomes (Colossoma macropomum), the chromosome mapping of
retrotransposable elements Rex1, Rex3, Rex6 and detection of constitutive heterochromatin
was performed. Tambaqui specimens were acclimatized for 40 days, after which (CL50-96h =
0.870 mg / L) was determined. In this study the fish were distributed in two concentrations to
be used: C1-30% and C2-50% of the value of CL50-96h, were used for this experiment 9
polyethylene tanks with controlled water volume of 60 liters containing 6 fish in each tank.
The tambaqui presented 2n = 54 chromosomes (26m + 28sm) and the fundamental number
(NF) 108, the predominant presence of heterochromatic blocks in the centromeric portions of
all pairs of mitotic chromosomes of the control group and the presence of more conspicuous
heterochromatic blocks with markings bitelomeric, marking in the terminal region in the
condition of higher concentration of Trichlorfon. The distribution of the Rex1, Rex3, Rex6
retroelements were dispersed and differentiated, the Rex1 and Rex6 sites exhibited a more
dispersed distribution profile while Rex3 showed increased mark intensity and distribution
pattern, as well as association with heterochromatic blocks (C2-72h), possibly mediated by
adaptive epigenetic mechanisms aimed at suppressing the mobilization of these retroelements
induced by exposure to Trichlorfon more evident in the specimens exposed to the higher
concentration and the longer period of exposure, being able to reflect on the genetic diversity
necessary for that these species can adapt to environmental changes
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