Dissertação
Cultura de Tecidos Vegetais de Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae) e Isolamento do Trans-decosil-4-hidroxi-3-metoxicinamato
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Instituto Nacional Pesquisas da Amazônia - INPA
Resumo
Minquartia guianensis (Olacaceae) é uma espécie vegetal de elevado valor
econômico na região Amazônica, é intensamente explorada pelo setor madeireiro
para diversos fins devido à alta durabilidade de sua madeira. A espécie também é
utilizada para fins medicinais por índios e populações ribeirinhas, contra infecções
intestinais, reumatismo, dores e irritações cutâneas. Estudos químicos relatam a
presença de diversas substâncias com grande potencial biológico. O presente
trabalho visou obter calos in vitro de M. guianensis a fim de identificar e isolar as
substâncias químicas de seus extratos. Para isto, este trabalho seguiu duas frentes,
sendo a primeira com a multiplicação e análise fitoquímica dos calos obtidos de
estudos prévios; e a segunda, seguindo as etapas de formação de novos calos a
partir de uma nova coleta. Os calos previamente estabelecidos in vitro, foram
multiplicados em meio de cultura MS (Murashige e Skoog) com reguladores de
crescimento, ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) e cinetina (CIN). Após secagem e
moagem, os calos foram extraídos com diclorometano (DCM), metanol (MeOH) e
água (H2O). O extrato DCM forneceu a substância trans-docosil-4-hidroxi-3-
metoxicinamato (trans-ferulato de docosila). Quanto à formação de novos calos,
foram coletadas folhas e sementes de um espécime adulto de M. guianensis no
INPA, que foram submetidos a processos de desinfestação em fungicida +
estreptomicina, etanol 70%, hipoclorito de cálcio e hipoclorito de sódio, onde foi
possível obter um protocolo eficiente de desinfestação para os explantes foliares. As
sementes foram inoculadas em meio de cultura MS com adição de ácido giberélico
(GA3) e após 120 dias obtiveram-se quatro plântulas. As folhas das plântulas obtidas
da germinação in vitro e do espécime in vivo, foram inoculados em meio de cultura
MS 100%; MS 50% e WPM (Wood Plant Medium) adicionado com os reguladores de
crescimento 2,4-D e CIN, onde foi possível a formação de calos em todos os
tratamentos, porém houve oxidação e morte do tecido foliar em todos os
tratamentos. Este é o primeiro relato de cultura de tecidos da espécie M. guianensis
e do isolamento da substância trans-docosil-4-hidroxi-3-metoxicinamato produzida
por calos.
Abstract:
Minquartia guianensis (Olacaceae) is a plant species of high economic value in the
Amazon region, is intensively exploited by the timber sector for several purposes due
to the high durability of its wood. The species is also used for medicinal purposes by
Indians and riverine populations, against intestinal infections, rheumatism, pains and
skin irritations. Chemical studies report the presence of several substances with great
biological potential. The present work aimed to obtain callus in vitro of M. guianensis
in order to isolate the chemical substances from their extracts. For this, this work
followed two fronts, being the first with the multiplication and phytochemical analysis
of callus obtained from previous studies; and the second, following the steps of
formation of new calluses from a new collection. The previously established callus in
vitro were multiplied in MS culture medium (Murashige and Skoog) with growth
regulators 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) and kinetin (CIN). After drying and
milling, the calluses were extracted with dichloromethane (DCM), Methanol (MeOH)
and Water (H2O). The DCM extract provided the substance trans-docosyl-4-hydroxy3-methoxycinnamate (docosyl trans-ferulate). Regarding the formation of new callus,
leaves and seeds of an adult specimen of M. guianensis were collected at INPA,
which were submitted to disinfestation in fungicide + streptomycin, 70% ethanol,
calcium hypochlorite and sodium hypochlorite, where it was possible To obtain an
efficient disinfestation protocol for leaf explants. The seeds were inoculated in MS
medium with addition of gibberellic acid (GA3) and after 120 days four seedlings
were obtained. The leaves of the seedlings obtained from in vitro germination and the
in vivo specimen were inoculated in 100% MS culture medium; MS 50% and WMP
(Wood Medium Plant) added with the growth regulators 2,4-D and CIN, where callus
formation was possible in all treatments, but there was oxidation and leaf tissue
death in all treatments. This is the first report of tissue culture of the M. guianensis
species and the isolation of the trans-docosyl-4-hydroxy-3-methoxycinnamate
substance produced by calluses.
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