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Título: Efetividade de formulações nanoestruturadas com dilapiol (Piper aduncum Linnaeus, 1753) e piretróides no controle de Anopheles darlingi Root, 1926
Autor: Gomes, Erika de Oliveira
Orientador: Tadei, Wanderli Pedro
Coorientador: Tedesco, Antonio Claudio
Palavras-chave: Anopheles
Piper aduncum
Malária
Data do documento: 30-Jul-2012
Editor: Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA
Programa: Entomologia
Abstract: Malaria is an infectious disease caused by protozoan parasites of the genus Plasmodium, which are transmitted among humans by mosquitoes of the genus Anopheles. The aim of this study was to assess the repellent effects of dillapiol isolated from Piper aduncum and its nanostructured formulations against adult Anopheles darling mosquitoes. It was also assessed the synergistic effect when it was associated with the chemical insecticides deltamethrin, cypermethrin, and alfa-cipermetrin, as well as the effect of topical application of such compounds. The oil was extracted from leaves using the technique of steam distillation conducted in Clevenger apparatus; dillapiol was isolated by column chromatography. Dillapiol oil and chemical insecticides were nanocoated with PLA and PLGA polymers. Nanocapsule morphology was analyzed by Scanning Electron Microscopy SEM. For repellency tests, dillapiol pure oil was used both in conventional form (an amount of 0.762 g) and nanocoated (an amount of 0.865 g). In this assay, 25 volunteer couples placed simultaneously their treated and untreated arms within net cages containing 50 A. darlingi female mosquitoes each. Regarding the wall bioassays, they were carried out according to the procedure standardized by the World Health Organization WHO. The basic material was constituted of a kit of cone chambers model (VBC/ 81.5), which was attached to wooden boards impregnated with both nanocoated samples and commercial insecticides. Regarding the topical application, every nanocoated sample was sprayed into three cages containing ten mosquitoes each, by means of a paint gun attached to a compressor. The results from the repellency tests of nanocoated samples, containing the Sepigel and Carbopol 0.7 % carriers and dillapiol revealed effectiveness at every time interval analyzed. The number of bites observed at the treated arm was significantly lower than at the untreated one. It was also significant that the number of bites depended on the interaction between substance and time. Dillapiol nanocapsule containing 0.7 % Carbopol carrier showed a greater repellency potential amongst the nanocoated samples analyzed. The lack of significant difference was observed when using dillapiol pure oil, whose repellency was effective up half an hour after application. Wall bioassay showed the effectiveness of nanocoated samples in relation to commercial ones, also indicating a synergistic potential when associated nanocapsules were analyzed. The evaluation of synergistic potential of nanocoated dillapiol and its combinations with pyrethroids indicated the efficacy of this compound as an alternative to reduce the amount of chemicals used in the field, especially in intra-home spraying. Scanning electron microscopy analysis showed that the nanoparticles kept attached to the nervures of mosquito wing scales, and are promising alternatives to synthetic chemicals, when regarding intra-home spraying. The results of this study are an indicative that dillapiol be nanocoated or pure oil is a viable alternative to be used as a repellent against malaria mosquitoes. The use of dillapiol nanostructured formulations in combination with pyrethroids demonstrate the synergistic potential that these compounds have against Anopheles darlingi, the main vector of human malaria in the Amazon.
Resumo: A malária é uma doença infecciosa, causada por protozoários do gênero Plasmodium, transmitidos ao homem pela picada de mosquitos do gênero Anopheles. O objetivo deste trabalho foi analisar o dilapiol isolado de Piper aduncum e em formulações nanoestruturadas utilizado contra adultos de Anopheles darlingi, identificando-se o potencial de repelência, o efeito sinergístico quando associado aos inseticidas químicos Deltametrina, Cipermetrina e Alfacipermetrina, e o efeito do contato tópico destes compostos. O óleo foi extraído das folhas através da técnica de araste à vapor pela aparelhagem de clevenger e o dilapiol isolado por cromatografia em coluna. O óleo de dilapiol e os inseticidas químicos foram nanoencapsulados com polímeros de PLA e PLGA. A morfologia das nanocápsulas foi analisada por Microscopia Eletrônica de Varredura MEV. Para os testes de repelência, utilizamos o óleo puro de dilapiol na quantidade de 0,762 g e o óleo puro de dilapiol nanoencapsulado quantificado em 0,865 g. Neste teste 25 casais voluntários colocaram os braços tratados e não tratados simultaneamente nas gaiolas de rede, contendo 50 fêmeas de A.darlingi em cada. Em relação à Prova Biológica de Parede, os testes foram realizados de acordo com o método padrão da OMS, sendo o material básico um kit de cone chambers modelo (VBC/81.5) utilizado em placas de madeira impregnadas com as amostras nanoencapsuladas e com amostras de inseticidas comerciais. Sobre a Aplicação Tópica, cada amostra nanoencapsulada foi borrifada em três gaiolas com 10 mosquitos cada, utilizando um revolver de pintura, acoplado ao compressor. Os resultados dos testes de repelência das amostras nanoencapsuladas com os veiculadores Sepigel e Carbopol 0,7% contendo o dilapiol evidenciaram eficácia em todos os intervalos de tempo analisados. O número de picadas no braço tratado foi significantemente menor que o não tratado, sendo igualmente significativo que o número de picadas depende da interação entre a substância e o tempo. A nanocápsula de dilapiol com o veiculador Carbopol 0,7% mostrou maior potencial de repelência entre amostras nanoencapsuladas analisadas, sem diferença significativa em relação ao óleo puro do dilapiol, sendo efetiva a repelência até uma hora e meia após a aplicação. A prova biológica de parede indicou efetividade das amostras nanoencapsuladas em relação às comerciais, evidenciando também um potencial sinergístico quando as nanocápsulas associadas foram analisadas. A avaliação do potencial sinergístico do dilapiol nanoencapsulado e as associações com os piretróides indicaram a eficácia deste composto como uma alternativa para redução da quantidade do produto químico utilizado em campo, especialmente nas borrifações intradomiciliares. A análise em microscopia eletrônica de varredura mostrou que as nanopartículas ficam aderidas às nervuras das escamas da asa do mosquito, sendo promissoras alternativas aos produtos químicos sintéticos, no que se diz respeito à borrifação intradomiciliar. Os resultados deste trabalho indicam o dilapiol puro e nanoencapsulado como alternativa viável para o uso como repelente contra mosquitos da malária e as formulações nanoestruturadas do dilapiol em associação com piretróides representam o potencial sinergístico que estes compostos possuem contra Anopheles darlingi, principal vetor da malária humana na Amazônia.
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