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Diferenciação genética em espécies de Anopheles do Subgênero Nyssorhynchus e Anopheles da Amazônia brasileira, Com base em dados isoenzimáticos e do DNA mitocondrial
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Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA
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Foram analisadas nove espécies de Anopheles dos subgêneros Nyssorhynchus e
Anopheles, utilizando-se marcadores isoenzimático e a região controle do DNA
mitocondrial para verificar as diferenças genéticas intra e interespecífica que possam estar
relacionadas à capacidade vetorial de cada espécie, e tentar compreender as relações de
parentescos entre elas. Para a análise isoenzimática foram empregados oito sistemas (EST,
LAP, IDH, MDH, HK, ME, PGM e PGI), em gel de amido e amido-agarose com tampões e
colorações específicas. Os resultados revelaram que dos 13 locos analisados, nove
mostraram-se polimórficos (EST1, EST5, LAP1, LAP2, IDH1, MDH1, HK3, ME1, PGM).
Das nove espécies estudadas, A. albitarsis de Maruanum-AP apresentou o maior
polimorfismo (P = 53.8%). No entanto, A. darlingi de Macapá-AP mostrou maior
heterozigosidade (Ho = 0,167 ± 0,071 e He = 0,173 ± 0,061). A análise da estrutura
genética, com base nas estatísticas de Wright para as populações de A. albitarsis, A.
darlingi e A. benarrochi mostraram que os locos apresentaram elevada estruturação
genética (Fst = 0,082, Fst = 0,110 e Fst = 0,016, respectivamente). No entanto, a distância
genética nas populações de A. darlingi, A. albitarsis e A. benarrochi mostrou grande
similaridade. Considerando todas as populações das espécies analisadas, a distância
genética foi maior, variando de 0,003 a 1,144. Os dados da região controle do DNA
mitocondrial mostraram pouca diferença sendo observada variação na composição
nucleotídica quanto ao conteúdo de adenina (A) e timina (T) nas espécies dos dois
subgêneros. O subgênero Nyssorhynchus foi o que apresentou maior composição de A e T
indicando maior polimorfismo, decorrente, possivelmente de uma maior taxa de mutação.
A distância nucleotidica interespecífica variou de 0,6 a 44,2%, indicando maior divergência
genética quando comparada aos dados isoenzimáticos. Os dados isoenzimáticos e do DNA
mitocondrial das espécies estudadas mostraram que A. oswaldoi e A. rangeli foram as mais
similares geneticamente.
Abstract:
Nine species of Anopheles of the subgenera Nyssorhynchus and Anopheles were
analysed using isoenzymatic markers and the DNA mitochondrial control region in order to
ascertain the intra e inter-specific genetic differences that may be related to each species
vectoring ability, and to try to understand the parental relationships among them. Eight
systems (EST, LAP, IDH, MDH, HK, ME, PGM and PGI), in starch and starch-agarose gel
with specific buffers and staining were employed for the isoenzymatic analysis. The
findings revealed that of the 13 analysed loci, nine were polymorphic (EST1, EST5, LAP1,
LAP2, IDH1, MDH1, HK3, ME1, PGM). Of the nine studied species, A. albitarsis from
Maruanum presented the highest polymorphism (P = 53.8%). Nevertheless, A. darlingi
from Macapá showed higher heterosygosity (Ho = 0.167 ± 0.071 and He = 0.173 ± 0.061).
The genetic structure analysis, based on the Wright statistics for the populations of A.
albitarsis, A. darlingi and A. benarrochi showed that the loci presented high genetic
structuring (Fst = 0.082, Fst = 0.110 and Fst = 0.016, respectively). Nonetheless, the genetic
distance in populations of A. darlingi, A. albitarsis and A. benarrochi showed great
similarity. Considering all analysed species populations, the genetic distance was greater,
ranging from 0.003 to 1.144. Mitochondrial DNA control region data showed little
difference being variation observed on the nucleotidic composition as to the adenine (A)
and timine (T) content in the species of the two subgenera. Subgenus Nyssorhynchus was
the one presenting higher A and T composition indicating higher polymorphism, due
possibly to a higher mutation rate. Inter-specifics nucleotidic distance ranged from 0.6 to
44.2%, indicating higher genetic divergence when compared with the isoenzymatic data.
Mitochondrial DNA and isoenzymatic data from the studied species showed that A.
oswaldoi and A. rangeli were the most genetically similar.
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