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Título: Taxonomia de Macronema Pictet (Insecta: Trichoptera: Hydropsychidae) e associação de larvas e adultos por meio do metamorfótipo e sequências de DNA do gene COI
Autor: Vidovix, Thyago Augusto da Silva
Orientador: Pes, Ana Maria Oliveira
Coorientador: Miller, Janisete Gomes da Silva
Palavras-chave: Insetos aquáticos
Larvas
Insetos
Data do documento: 3-Jun-2013
Editor: Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia - INPA
Programa: Entomologia
Abstract: Although the family Hydropsychidae and the genus Macronema have a high tolerance to environmental changes, its use in freshwater biomonitoring programs has been greatly hampered by the lack of identified and illustrated larvae. Conventional tools to associate larvae with adults have generally been slow and problematic, so a faster and safer technique is proposed, integrating morphology with molecular analysis. Integrative taxonomy is defined by the integration of different types of analyzes, for example using morphological and molecular characters available to delimit species. Adults and larvae were collected in two municipalities, Manaus and Presidente Figueiredo/AM, which were identified using the adult male genitalia and the staining pattern of the forewings, and the larvae classified in morphotypes before the molecular analysis. DNA was extracted from the morphotyped specimens and a fragment of the mitochondrial DNA gene cytochrome oxidase subunit 1 (COI) was amplified for 43 specimens, which were sequenced. The sequence from an outgroup (from the same mitochondrial region) was obtained from GenBank. Phylogenetic analyses were carried out using the methods of Maximum Parsimony (MP), Neighbor-Joining (NJ) and Maximum Likelihood using the Kimura-2-parameters (K2P) model. As a result, eight species of larvae were associated successfully, six females were also associated with the males through the staining pattern and DNA analysis. Two new species to science and four larvae not associated before were described in this study facilitating further the association studies. This study may also be useful to associate male and female, to assist in species identification and reveal cryptic species not just within the genus Macronema, but also encompassing other taxonomic levels.
Resumo: Apesar da família Hydropsychidae e do gênero Macronema possuírem uma elevada tolerância a alterações ambientais, a sua utilização em programas de biomonitoramento de qualidade de água doce tem sido altamente impedida pela falta de larvas identificadas e ilustradas. Ferramentas convencionais para associar larvas com adultos, geralmente são demoradas e problemáticas, assim uma técnica rápida e segura é proposta, integrando a morfologia com a análise molecular, principalmente do gene mitocondrial COI. Foram coletados adultos e larvas em dois municípios Manaus, Presidente Figueiredo e Barcelos/AM, dos quais foram identificados os adultos machos utilizando-se a genitália e o padrão de coloração das asas anteriores e as larvas separadas em morfótipos antes de submetidas à análise molecular. Dos espécimes descritos e morfotipados, foi extraído o DNA e amplificado um fragmento do gene mitocondrial Citocromo Oxidase subunidade 1 (COI) de 43 espécimes, os quais foram sequenciados. A sequência do grupo externo (da mesma região mitocondrial) foi obtido no GenBank e de exemplares do gênero Macrostemum ulmeri (Banks). As análises filogenéticas foram realizadas utilizando-se os métodos de Máxima Parcimônia (MP), Máxima Verossimilhança (ML) e Neighbor-Joining (NJ) utilizando-se o modelo evolutivo Kimura-2-Parâmetros (K2P). Como resultado, oito espécies de larvas foram associadas com êxito, seis fêmeas também foram associadas a machos através do padrão de coloração e análise do DNA. Foram descritas neste trabalho três novas espécies para a ciência e quatro larvas não associadas facilitando trabalhos futuros de associação. Este estudo pode ser útil também para relacionar macho e fêmea, ajudar na identificação de espécies e revelar espécies crípticas, não só do gênero Macronema, mas também abrangendo outros níveis taxonômicos.
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