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Título: Diversidade de espécies de Geophagus Heckel, 1840 (Cichliformes: Cichlidae) da bacia amazônica utilizando abordagem genômica e de DNA mitocondrial
Autor: Ximenes, Aline Mourão
Orientador: Farias, Izeni Pires
Palavras-chave: Peixes
Diversidade oculta
Espécies candidatas
SNPs
COI
Data do documento: 2-Mai-2023
Programa: Genética, Conservação e Biologia Evolutiva - GCBEv
Abstract: The Neotropics are home to the largest community of freshwater fish in the world, knowing this diversity is important for the conservation of fish, especially those already exploited for commercial purposes, as is the case with species of the genus Geophagus. Many representatives of this genus are exploited by the national and international aquarium trade, but delimiting and quantifying species such as those of this genus can be a difficult task, since the group is considered specious and problematic in several taxonomic levels. Molecular approaches are being used in order to improve biodiversity estimates, and species discovery methods from single locus (SLSD) and multilocus have been complemented to improve these estimates. This study aims to: (i) investigate the diversity of Geophagus sensu stricto; (ii) map the species/lineages indicated with COI; (iii) test whether the COI data are corroborated with the SNPs data. To meet objectives (i and ii) the cytochrome c oxidase subunit I (COI) of 337 individuals sampled in 77 locations inside and outside the Amazon basin were sequenced. Four methods with different approaches for species delimitation from a single locus were used. The results showed six new morphologically distinct lineages that were corroborated by most of the SLSD methods, the numbers of lineages varied according to the method (15-mPTP; 14-LocMin; 18-bGMYC and 30-GMYC). For the mapping of the lineages, the bGMYC method was considered, since it was observed that it was the most consistent with the morphological data and also because it presents a spatial distribution pattern in accordance with what is known for other fish species. To meet objective (iii) 87 individuals were used to obtain genomic data, these individuals were representative of the 337 sequenced by COI, both in species diversity and in sampled locations. To obtain the SNPs, the ddRADs methodology was used, 15 million readings were obtained and 3757 SNPs were captured with a size greater than 200 bp. The taxonomic hypothesis tested was: which of the four delimitation methods (mPTP; LocMin; bGMYC and GMYC) is supported with the SNPs data? The results of the hypothesis tests showed that the GMYC method was the most supported by the genomic data. In addition to these tests, a phylogenetic comparison was performed by mirroring two trees, one obtained with SNPs and the other with COI. The results of the hypothesis tests showed that the GMYC method was the most supported by the genomic data. In addition to these tests, a phylogenetic comparison was performed by mirroring two trees, one obtained with SNPs and the other with COI. The results showed that both markers were not able to resolve the phylogenetic relationships of the species/lineages, however the COI recovered the monophyly of all species/lineages (except Geophagus sp. 5) and SNPS were not able to confirm the monophyly of the most species/strains. The SNPs data also showed signs of hybridization in some of the studied Geophagus species. Therefore, our results show a cryptic diversity, with putative species inhabiting areas threatened by anthropic activity and highlight the importance of combining mitochondrial and nuclear DNA data in biodiversity estimation studies, especially in taxonomically diverse tropical biotas.
Resumo: O neotrópico abriga a maior comunidade de peixes de água doce do mundo, conhecer essa diversidade é importante para a conservação dos peixes, especialmente aqueles já explorados para fins comerciais, como é o caso das espécies do gênero Geophagus. Muitos representantes desse gênero são explorados pelo comércio aquarista nacional e internacional, mas delimitar e quantificar espécies como as deste gênero, pode ser uma tarefa difícil, já que o grupo é considerado especioso e problemático em vários níveis taxonômicos. Abordagens moleculares estão sendo utilizadas com objetivo de melhorar as estimativas de biodiversidade, e os métodos de descoberta de espécies a partir de locus único (SLSD-Single Locus Species Delimitation) e multilocus tem se complementando para melhorar essas estimativas. Este estudo tem como objetivos: (i) investigar a diversidade de Geophagus sensu stricto; (ii) mapear as espécies/linhagens apontadas com COI; (iii) testar se os dados de COI são corroborados com os dados de SNPs. Para atender os objetivos (i e ii) foram sequenciados o citocromo c oxidase subunidade I (COI) de 337 indivíduos amostrados em 77 locais dentro e fora da bacia Amazônica. Foram utilizados quatro métodos com diferentes abordagens para delimitação de espécies a partir de locus único. Os resultados apontaram seis novas linhagens morfologicamente distintas e que foram corroboradas pela maioria dos métodos SLSD, os números de linhagens variaram de acordo com método (15- mPTP; 14-LocMin; 18-bGMYC e 30-GMYC). Para o mapeamento das linhagens considerou-se o método bGMYC, pois observou-se que ele foi o mais concordante com os dados de morfologia e também por apresentar um padrão de distribuição espacial de acordo com conhecido para outras espécies de peixes. Para atender o objetivo (iii) foram utilizados 87 indivíduos para obtenção dos dados genômicos, esses indivíduos foram representativos dos 337 sequenciados pelo COI, tanto em diversidade de espécies quanto em locais amostrados. Para obtenção dos SNPs utilizou-se a metodologia ddRADs, foram obtidos 15 milhões de leituras e 3757 SNPs foram capturados com tamanho maior que 200 pb. A hipótese taxonômica testada foi: qual dos quatro métodos de delimitação (mPTP; LocMin; bGMYC e GMYC) é suportada com os dados de SNPs? Os resultados dos testes de hipótese mostraram que o método GMYC foi o mais suportado pelos dados genômicos. Além destes testes, foi executada uma comparação filogenética através do espelhamento entre duas árvores, sendo uma obtida com SNPs e a outra com COI. Os resultados mostraram que ambos os marcadores não foram capazes de resolver as relações filogenética das espécie/linhagens, contudo o COI recuperou a monofilia de todas as espécie/linhagens (exceto de Geophagus sp. 5) e SNPS não foram capazes de confirmar a monofilia da maioria das espécies/linhagens. Os dados de SNPs também apontaram sinais de hibridização em algumas das espécies de Geophagus estudadas. Portanto, nossos resultados mostram uma diversidade críptica, com espécies putativas habitando áreas ameaçadas por atividade antrópica e destacam a importância de combinar dados de DNA mitocondrial e nuclear em estudos de estimativa da biodiversidade, especialmente em biotas tropicais taxonomicamente diversas.
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