Dissertação
Perfil de metilação do tambaqui amazônico (Colossoma macropomum) de cativeiro exposto ao antiparasitário Triclorfon
Carregando...
Data
Organizadores
Autores
Orientador(a)
Coorientador(a)
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Resumo
A técnica de PCR sensível à metilação (MS-PCR) é simples e eficaz. Ela utiliza a sensibilidade das enzimas HpaII e MspI no sítio CCGG, à presença de metilação nas citosinas do palíndromo. A clivagem acontece pela detecção ou não do radical metil na citosina interna (C5mCGG) ou externa (5mCCGG), o que possibilita a comparação do perfil de metilação do DNA, tendo como resultado os diferentes padrões de digestão. Até pouco tempo atrás, não havia relatos sobre o perfil de metilação utilizando enzimas de restrição em peixes amazônicos. No presente estudo foi investigado o status de metilação de sequências específicas de DNA de 18s rDNA e AChE de espécimes de tambaqui (Colossoma macropomum, Characiformes, Serrasalmidae) de cativeiro submetidos ao antiparasitário Triclorfon. Nossas análises, sugerem que há um aumento de fragmentos metilados do gene 18S rDNA em 72h e 96h de exposição ao Triclorfon, nas concentrações de 30% e 50% da CL50-96h para tambaqui. Já no gene da AChE não observamos diferenças no padrão de metilação.
Abstract:
The methylation-sensitive PCR (MS-PCR) technique is simple and effective. It uses the sensitivity of the enzymes HpaII and MspI at the CCGG site, to the presence of methylation in the cytosines of the palindrome. Cleavage occurs by detecting or not the methyl radical in the internal (C5mCGG) or external (5mCCGG) cytosine, which makes it possible to compare the DNA methylation profile, resulting in different digestion pattems. Until recently, there were no reports on the methylation profile using restriction enzymes in Amazonian fish. In the paresent study, the methylation status of specific DNA sequences of 18s rDAN and AChE from specimens of tambaqui (Colossoma macropomum, Characiformes, Serrasalmidae) from captivity to the antiparasitic Triclorfon was investigated. Our analyzes, results that there is an increase of methylated fragments of the 18S rDNA gene in 72h and 96h of exposure to Triclorfon, in the recommendations of 30% and 50% of the LC50 -96h for tambaqui. In the AChE gene, however, we did not observe differences in the methylation pattem.