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EFEITOS DO TRICLORFON SOBRE A EXPRESSÃO GÊNICA DE BIOMARCADORES ECOTOXICOLÓGICOS HSP70, CYP, GST E ACHE EM TAMBAQUI (Colossoma macropomum, SERRASALMIDAE)
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Resumo
O Brasil possui diversas espécies nativas de peixes com potencial para a produção em cativeiro
e, dentre elas, o tambaqui Colossoma macropomum (tambaqui) amplamente cultivado em
diversas regiões do país devido ao crescimento e desenvolvimento da piscicultura. Os produtores
de peixes têm procurado alternativas viáveis para o manejo desta espécie em sistemas de
confinamento, para evitar prejuízos causados por doenças parasitárias. Uma estratégia
frequentemente adotada é o uso de compostos químicos antiparasitários, como, o triclorfon.
Antiparasitários à base de organoclorados e organofosforados, são amplamente utilizados na
piscicultura para o controle de doenças. No entanto, apresentam efeitos genotóxicos e seus
mecanismos ainda são desconhecidos. Dessa forma, este estudo teve como avaliar os efeitos subletais do triclorfon no tambaqui (Colossoma macropomum) com foco na expressão de
biomarcadores relacionados ao estresse químico e ecotoxicidade. Foram utilizados dois
tratamentos com concentrações correspondentes a 30% e 50% da CL50-96h (0,870 mg/L,
previamente relatado na literatura para o tambaqui) de triclorfon com períodos de exposição de
48, 72 e 96 horas. A expressão diferencial de genes biomarcadores (AChE, GST, Hsp70, CYP2J6
e CYP2C8) foi analisada por PCR em tempo real, utilizando o gene 18S, gapdh e β-actin como
genes de referência. Os tecidos avaliados incluíram fígado, cérebro, brânquias e músculo. No
fígado, a expressão gênica do CYP2J6 e CYP2C8 não apresentaram alterações nos diferentes
tempos e concentrações utilizadas neste estudo. Já após 96 h de exposição ao triclorfon neste
mesmo tecido, observou-se uma diminuição no perfil de expressão gênica do sistema de defesa
antioxidante (GST) do tambaqui. No cérebro, a concentração de 30% da Cl50-96h de triclorfon
observou-se uma redução na expressão gênica da acetilcolinesterase (AChE). No músculo, na
concentração de 50% nos tempos 48 e 72 horas para os genes AChE e Hsp70 ocorreu uma
diminuição na sua expressão. Nas brânquias, apenas o gene AChE para a concentração de 30%
teve um aumento nos níveis de expressão gênica após 48 horas de exposição. Concluiu-se que
os níveis de expressão dos genes AChE, GST, Hsp70 e CYP em diferentes tecidos do tambaqui,
variaram conforme a concentração e o tempo de exposição ao triclorfon, dados que mostram a
relevância de identificar padrões em genes específicos, além da sua aplicação em
monitoramentos ambientais
Abstract
Brazil has several native fish species with potential for captive production, including the
tambaqui Colossoma macropomum (tambaqui), which is widely cultivated in several regions of
the country due to the growth and development of fish farming. Fish producers have been seeking
viable alternatives for managing this species in confinement systems to avoid losses caused by
parasitic diseases. One strategy frequently adopted is the use of antiparasitic chemical
compounds, such as trichlorfon. Antiparasitics based on organochlorines and organophosphates
are widely used in fish farming for disease control. However, they have genotoxic effects and
their mechanisms are still unknown. Therefore, this study aimed to evaluate the sublethal effects
of trichlorfon on tambaqui (Colossoma macropomum) with a focus on the expression of
biomarkers related to chemical stress and ecotoxicity. Two treatments with concentrations
corresponding to 30% and 50% of the LC50-96h (0.870 mg/L, previously reported in the
literature for tambaqui) of trichlorfon were used with exposure periods of 48, 72 and 96 hours.
The differential expression of biomarker genes (AChE, GST, Hsp70, CYP2J6 and CYP2C8) was
analyzed by real-time PCR, using the 18S gene, gapdh and β-actin as reference genes. The tissues
evaluated included liver, brain, gills and muscle. In the liver, the gene expression of CYP2J6 and
CYP2C8 did not show changes at the different times and concentrations used in this study. After
96 h of exposure to trichlorfon in this same tissue, a decrease in the gene expression profile of
the antioxidant defense system (GST) of tambaqui was observed. In the brain, a 30%
concentration of Cl50-96h trichlorfon showed a reduction in acetylcholinesterase (AChE) gene
expression. In the muscle, at a 50% concentration at 48 and 72 hours, there was a decrease in the
expression of the AChE and Hsp70 genes. In the gills, only the AChE gene at a 30%
concentration had an increase in gene expression levels after 48 hours of exposure. It was
concluded that the expression levels of the AChE, GST, Hsp70 and CYP genes in different
tissues of tambaqui varied according to the concentration and time of exposure to trichlorfon,
data that show the relevance of identifying patterns in specific genes, in addition to their
application in environmental monitoring.